原生质体培养再生植株的技术路线（原生质体培养）

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1、原生质体培养和其他组织培养一样，培养基中需要氮、磷、钾、钙、镁、硫及铁等大量元素，以及锰、锌、铝、铜和钴等微量元素营养源，同时还需要糖类物质和许多有机营养，添加适当浓度的激素。

2、与细胞培养相比，只去除了细胞壁，因此，原生质体培养基一般是改变的细胞培养基，用于培养植物细胞的矿质盐成分已经被调整到使之满足培养原生质体的特殊需要。

3、原生质体培养基通常含有一种或更多种的氨基酸。

4、最方便的方法是加入0.01%0.25%的不含维生素的酪蛋白氨基酸或酪蛋白水解物。

5、另加入15mmolL的L-甘氨酸能提高生长速度。

6、大部分原生质体培养基含有一种或多种植物生长素，另外还含有一种或多种细胞分裂素，以促进原生质体分裂和生长。

7、只有几种原生质体的生长不需要在培养基中添加生长调解剂。

8、一般来说，原生质体培养刚开始时用较高浓度的NAA（13mgL）和较低浓度的BAP或玉米素（0.11.0mgL）。

9、原生质体培养基中应当去除铵（NHsuperscript+superscriptsubscript4subscript不能过多），因为它对原生质体的生存是有害的，而铁、锌等离子的量也应当减少。

10、另外，钙的浓度应当比通常培养细胞所需的浓度增加24倍，提高钙的浓度能改善膜的稳定性。

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